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DNA Ligation Kit Ver.2.1


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  • 货号 6022
  • 品牌 TaKaRa ( 独家代理 )
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  • 规格/包装 1 Kit (100 次)
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    商家描述 商家资质信息 产品评价(5)
    说明书：http://www.takara.com.cn/DownLoad/6022.pdf
    ■ 制品内容 (Code No.: 6022)
    Solution Ⅰ：Enzyme Solution 3 × 250 μl
    Solution Ⅱ：Concatenation Buffer 1 × 750 μl
    Solution Ⅲ：Transformation Enhancer 1 × 200 μl
     
    * 如果每次使用7.5 μl Solution Ⅰ则可反应100次。
     
    ■ 制品说明
    本试剂盒是用于快速DNA连接反应的简易系统。在本试剂进行连接反应时，只需要加入一种包含T4 DNA Ligase和最适buffer的酶溶液，终反应液体积小。因为反应高效，大多数连接反应只需3分钟，较难的反应也可在30分钟内完成。
    转化之前在连接混合液中加入Solution III（转化增强剂）有助于提高转化效率。如果目的DNA含量低或预期的连接效率较低，建议使用Solution III。连接反应液不必经过DNA纯化，可直接用于细菌的转化。
     
    ■ 保存
    -20℃。Solution Ⅲ融化后室温保存，如果产生沉淀，可涡旋数分钟溶解。
     
    ■ Ligation Kit 的操作示意图及连接效率图
     
     
    ■ 使用注意
    1. 试剂盒中的Solution Ⅰ和Solution Ⅱ建议-20℃保存，反复冻融不会失活。Solution Ⅰ因含有T4 DNA Ligase，使用前请在冰中融化并轻柔混匀。Solution Ⅱ可在室温融化并混匀。Solution Ⅲ一旦融化，就应于室温保存，若有沉淀，使用前请涡旋溶解。
    2. DNA连接液可直接用于琼脂糖凝胶电泳。如要进行聚丙烯酰胺凝胶电泳时，建议使用乙醇沉淀法*浓缩 DNA，请不要用苯酚抽提DNA连接液。
    * 乙醇沉淀法：
    1) 在反应液中加入1/10体积的3 M CH3COONa (pH5.2) 或1/20体积的5 M NaCl和2-2.5倍体积的无水乙醇。
    2) -20℃静置20分钟或-80℃静置10分钟。
    3) 4℃离心收集DNA。当DNA的含量较少时，可加入carrier使沉淀效果更好。
    3. 如果在反应液中加入苯酚，则会出现类似沉淀物的白色浑浊，将不能用于连接反应。

     

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